Estudio piloto para la reconstrucción del ligamento cruzado anterior (LCA) con cultivos de fibroblastos autólogos sobre membranas de colágeno I/III = Pilot study on the anterior cruciate ligament (ACL) reconstruction with autologous fibroblasts culture on collagen I/III membranes / López-Alcorocho Sánchez JM, Guillén García P, Rodríguez Íñigo E, Guillén Vicente I, Caballero Santos R, Guillén Vicente M, García Gómez F, Cuevas Sánchez P

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Bibliografía: p.38

Objetivo: Utilizar cultivos de fibroblastos sobre membranas de colágeno I/III para tratar la rotura del ligamento
cruzado anterior (LCA).
Pacientes y métodos: Estudio prospectivo con 100 biopsias de LCA de pacientes con rotura de LCA con las que
se realizaron cultivos primarios de fibroblastos. Tras alcanzar 20-30 millones, se transfirieron a membranas de
colágeno I/III, donde se determinó su disposición mediante tinción con hematoxilina-eosina y la expresión de los
genes colágeno de tipo I (Col-I), colágeno de tipo III (Col-III), tenascina-C y Sox-9 mediante PCR en tiempo real.
Resultados: A los 30 días de cultivo existía una correlación negativa entre la edad de los pacientes y la velocidad
de crecimiento de los fibroblastos (p=0,003). La histología reveló que las células se disponían entre la malla formada por las fibras de las membranas, expresando Col-I, Col-III, Sox-9 y tenascina-C, características del ligamento.
Conclusión: Es posible el establecimiento de cultivos primarios de fibroblastos derivados de LCA tanto in vitro
como sobre membranas de colágeno I/III sin que pierdan sus características primarias de células de ligamento.

Objective: To study the possibility on the use of the in vitro cultured on I/III collagen membranes for the treatment of
the broken anterior cruciate ligament (ACL).
Patients and methodology: Prospective study performed with 100 ACL biopsies from patients with broken ACL, in
which primary cultures of fibroblasts were established. When a number of 20-30 million was reached, they were transferred to I/III collagen membranes, where the architecture of the cells was examined by hematoxilin-eosin stained and
the expression of the collagen type I (Col-I), collagen type III (Col-III), tenascin-C and Sox-9 genes by real time PCR.
Results: A negative correlation between the age of the patients and the growth rate of the fibroblasts after 30 days of
setting-up the culture (p=0.003) was observed. The histology revealed that the cells were disposed within the membrane fibers net, where the cells expressed the characteristic proteins of the ligament: Col-I, Col-III, Sox-9 and tenascin-C.
Conclusion: It is possible to establish the primary culture of the ACL-derived fibroblasts, both in vitro and onto collagen I/III porcine membranes without losing their primary features of the ligament cells.